网上有很多关于Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理的知识,也有很多人为大家解答关于凝胶色谱柱分离原理的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
内容导航:

一、Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理
凝胶色谱的分离原理:
当含有各种分子的样品溶液缓慢流过凝胶色谱柱时,每个分子同时以两种不同的方式运动:垂直向下运动和无定向扩散运动。大分子由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,只能分布在颗粒之间,所以洗脱时向下运动速度较快。小分子物质不仅可以在凝胶颗粒之间的空隙中扩散,还可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。在向下运动的过程中,它们从一个凝胶扩散到颗粒之间的空隙,然后进入另一个凝胶颗粒。这种现象被称为分子筛效应。多孔凝胶是一种分子筛。
各种分子筛的孔径分布有一定的范围,有最大值和最小值。如果分子直径大于凝胶的最大孔径,它将被完全排除在凝胶颗粒之外。这种情况被称为完全排斥。即使两个完全排斥的分子大小不同,也不可能有分离效应。直径小于凝胶最小孔径的分子可以进入凝胶的所有孔。如果两种分子都能进入凝胶孔隙,即使大小不同,也不会有很好的分离效果。因此,某种分子筛有其一定的应用范围。
凝胶色谱有三种情况。一个是分子很小,可以进入分子筛的所有内部孔隙;二是分子太大,根本进不了凝胶的任何内部孔隙;第三,分子大小适中,能进入凝胶内孔的相应部分。大、中、小分子很容易相互分离,但在不改变凝胶类型的情况下,很难在凝胶分离范围之外分离每个分子。对于分子大小不同但属于凝胶分离范围的分子,在凝胶床中的分布是不同的:较大的分子只能进入孔径较大的凝胶孔部分,而较小的分子可以进入更多的凝胶颗粒,这样较大的分子在凝胶床中移动的距离较短,而较小的分子移动的距离较长。于是较大的分子先通过凝胶床,较小的分子通过凝胶床,这样不同分子量的物质就可以被分子筛分离。另外,凝胶本身具有三维网络结构,大分子通过这种网络结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。当许多分子量不同的组分通过凝胶床时,它们按分子量排列,凝胶表现出分子筛效应。
交联葡聚糖凝胶(葡聚糖凝胶):
(sephadex G交联葡聚糖的商品名是Sephndex。不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数字是凝胶水值的10倍。比如G-25膨胀时每克凝胶吸收2.5克水,G-200克每克胶水吸收20克水。交联葡聚糖凝胶的类型有G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100、G-150和G-200。因此,“G”反映了凝胶的交联度、溶胀度和分配范围。
Sephadex LH-20是Sephadex G-25的羧丙基衍生物,溶于水和亲脂性溶剂,用于分离水不溶性物质。
交联葡聚糖凝胶是将纯化的线性葡聚糖(a-1,b-吡喃葡聚糖)与环氧氯丙烷反应,引入甘油侧链,在葡聚糖链之间形成交联链,将所得凝胶制成不同直径的球体。得到的三维固体可以膨胀,但不溶于水。交联度越高,凝胶的孔径越小。
各种葡聚糖凝胶的分离范围及应用:
葡聚糖凝胶G-10分离范围;700适用于脱盐和从其他小分子中分离肽。
葡聚糖凝胶G-15葡聚糖凝胶G-15分离范围lt;1500适用于脱盐和从其他小分子中分离肽。
葡聚糖凝胶G-15葡聚糖凝胶G-15分离范围lt;1500适用于脱盐和从其他小分子中分离肽。
Sepharose 6B Sepharose gel 6B分离范围:1000-5000,适用于脱盐和其他小分子多肽的分离。
ConA-Sepharose ConA琼脂糖凝胶分离范围:1000-5000,适用于脱盐和其他小分子多肽的分离。
Sephadex G-25介质葡聚糖凝胶G-25的分离范围为1000-5000,适用于脱盐和其他小分子多肽的分离。
Sephadex G-25介质葡聚糖凝胶G-25的分离范围为1000-5000,适用于脱盐和其他小分子多肽的分离。
Sephadex G-25精葡聚糖凝胶G-25具有1000-5000的精细分离范围,适用于肽段与其他小分子的脱盐分离。
Sephadex G-25精葡聚糖凝胶G-25具有1000-5000的精细分离范围,适用于肽段与其他小分子的脱盐分离。
SephadexG-50介质葡聚糖凝胶G-50的分离范围为1500-30000;Sephadex G-50介质葡聚糖凝胶G-50的分离范围为1500-30000;Sephadex G-75葡聚糖凝胶G-75的分离范围为3000-80000。
葡聚糖凝胶G-75葡聚糖凝胶G-75的分离范围为3000-80000。
DEAE琼脂糖凝胶FF DEAE琼脂糖凝胶FF分离范围:3000-80000 Sephadex G-100 Sephadex G-100分离范围:4000-150000。
Sephadex G-100葡聚糖凝胶G-100分离范围为4000-150000。
Sephadex G-150 Sephadex G-150的分离范围为5000-300000。
DEAE Sepharose CI-6B Sepharose Gel CI-6B分离范围:5000-30万Sephadex G-150 Sephadex G-150分离范围:5000-30万。
Sephadex G-200葡聚糖凝胶G-200分离范围为5000-600000。
Sephadex G-200葡聚糖凝胶G-200分离范围为5000-600000。
Sephadex G-200葡聚糖凝胶G-200分离范围为5000-600000。
DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝胶A-25粒径:40-120m分离尺寸:小蛋白和大分子。
DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝胶A-25粒径:40-120m分离尺寸:小蛋白和大分子。
DEAE葡聚糖凝胶A-50 DEAE DEAE葡聚糖凝胶A-50粒径:40-120m,分离范围:小蛋白和大分子。
详情请参阅:
短小精悍的版本:
当含有各种分子的样品溶液缓慢流过凝胶色谱柱时,每个分子同时以两种不同的方式运动:垂直向下运动和无定向扩散运动。大分子由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,只能分布在颗粒之间,所以洗脱时向下运动速度较快。小分子物质不仅可以在凝胶颗粒之间的空隙中扩散,还可以进入凝胶颗粒的微孔,即进入凝胶相。在向下运动的过程中,它们从一个凝胶扩散到颗粒之间的空隙,然后进入另一个凝胶颗粒。于是它们继续进入并扩散,小分子物质的向下运动速度滞后于大分子物质,使样品中的大分子先流出色谱柱,中等分子后流出,最小分子最后流出。
以上就是关于Sephadex G-10凝胶色谱法分离原理的知识,后面我们会继续为大家整理关于凝胶色谱柱分离原理的知识,希望能够帮助到大家!









